基因毒性雜質(zhì)（GTIs, Genotoxic impurities）是藥物合成、配置及儲(chǔ)存過(guò)程中可能的中間體，反應(yīng)產(chǎn)物或降解物，其能直接或間接損傷細(xì)胞DNA，甚至產(chǎn)生致突變和致癌作用，因其毒性較強(qiáng)對(duì)用藥安全性產(chǎn)生了極大的威脅。自2018年從雷尼替丁及二甲雙胍中相繼發(fā)現(xiàn)亞硝胺類雜質(zhì)NDMA（N-亞硝基二甲胺），亞硝胺類基因毒性雜質(zhì)也受到了極大的關(guān)注。為防范類似事件再次發(fā)生，嚴(yán)格控制藥物的用藥安全，監(jiān)管部門陸續(xù)發(fā)布了關(guān)于藥物成分中基因毒性雜質(zhì)允許限值的指導(dǎo)原則以確保藥品的安全。對(duì)此，SCIEX持續(xù)關(guān)注并相繼出臺(tái)多種基因毒性雜質(zhì)檢測(cè)方案。
二甲雙胍是一種處方藥，臨床主要用來(lái)控制二型糖尿病人的高血糖，由于病人用藥周期較長(zhǎng)，其中基因毒類雜質(zhì)的危害也更大。本方案使用LC-MS/MS法同時(shí)測(cè)試二甲雙胍不同劑型中8種亞硝胺類雜質(zhì)的含量，該方法在滿足FDA對(duì)8種亞硝胺類雜質(zhì)靈敏度要求[1] 的同時(shí)可排除二甲基甲酰胺(DMF)對(duì)NDMA的干擾。另外，同時(shí)檢測(cè)雜質(zhì)個(gè)數(shù)及專屬性也優(yōu)于歐洲藥典5種亞硝胺方法[2]。
SCIEX Triple Quad? 4500系統(tǒng)
用于二甲雙胍中8種亞硝胺類基因毒性雜質(zhì)的檢測(cè)
SCIEX提供了SCIEX ExionLC?系統(tǒng) + SCIEX Triple Quad? 4500系統(tǒng)檢測(cè)二甲雙胍中8種亞硝胺雜質(zhì)的方法，該方法靈敏度高、選擇性強(qiáng)、重現(xiàn)性好，通過(guò)了多種劑型回收率驗(yàn)證且符合法規(guī)要求。
01
靈敏度
8種亞硝胺雜質(zhì)定量限低于1 ng/mL，完全滿足法規(guī)對(duì)基因毒雜質(zhì)靈敏度的要求。
圖1，1 ng/mL 對(duì)照品中8種亞硝胺化合物提取離子流圖
02
標(biāo)準(zhǔn)曲線
8種亞硝胺雜質(zhì)在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.997。
表1， 8種基因毒雜質(zhì)的線性范圍
03
回收率
8種亞硝胺雜質(zhì)在不同劑型二甲雙胍中回收率均在85%-115%之間，方法通用性好、抗基質(zhì)干擾能力強(qiáng)。
表2 ，8種基因毒雜質(zhì)回收率結(jié)果
04
專屬性
本方案可分開(kāi)二甲基甲酰胺(DMF)和NDMA，排除假陽(yáng)性，確保檢測(cè)結(jié)果更準(zhǔn)確。
圖2，NDMA雜質(zhì)及DMF干擾可完全分開(kāi)
參考文獻(xiàn)
[1]. Liquid Chromatography Electrospray Ionization High Resolution Mass Spectrometry Method for the Determination of Nitrosamine Impurities in Metformin Drug Substance and Drug Product，2020,03, U.S. FOOD & DRUG Administration.
[2]. European pharmacopoeia n-nitrosamines in active substances, Council of Europe, 2020. European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare (EDQM).
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